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技術(shù)文章
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新冠疫情爆發(fā)以來(lái)，熒光定量PCR（qPCR）的核酸檢測(cè)已經(jīng)成為新冠確診的“金標(biāo)準(zhǔn)”。與免疫檢測(cè)相比熒光定量PCR具有較高的靈敏度，檢測(cè)窗口期較短，可以更早地確診是否病毒感染。qPCR是如何實(shí)現(xiàn)新冠定量的？首先，從咽拭子/鼻拭子中抽提獲得新冠的遺傳物質(zhì)RNA，然后通過(guò)qPCR儀定量出拭子中的RNA病毒載量，就可以確定是否是新冠感染者。熒光定量PCR技術(shù)最主要的參數(shù)是擴(kuò)增曲線的ct值，該值與被定量樣本...
2023-02-15
SigmaAldrich是一家生命科學(xué)公司，致力于為全球科學(xué)研究和產(chǎn)業(yè)提供高質(zhì)量的實(shí)驗(yàn)室試劑和技術(shù)服務(wù)。其中，SigmaAldrich血管緊張素就是該公司生產(chǎn)的一種重要的生化試劑。血管緊張素是一種通過(guò)對(duì)血管收縮、腎臟鈉再吸收以及神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)等多種方式來(lái)維持血壓平衡的激素。血管緊張素I在腎臟等組織中被酶切分解為血管緊張素II，而血管緊張素II則是這個(gè)激素家族中Z具生物活性的成分之一。血管緊張素II通過(guò)與AT1受體結(jié)合，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的收縮，并進(jìn)一步導(dǎo)致心血管疾病的發(fā)展。Si...
SigmaAldrich脂多糖(LPS)是一種存在于細(xì)菌細(xì)胞壁中的高分子化合物，也被稱為內(nèi)毒素。LPS是由脂肪酸、多糖和磷酸肽組成的復(fù)雜分子，它們可以通過(guò)細(xì)菌的外膜進(jìn)入宿主體內(nèi)，并引起嚴(yán)重的免疫反應(yīng)。LPS是一種強(qiáng)烈的免疫原，它可以刺激機(jī)體產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子，如TNF-α、IL-1β、IL-6等，導(dǎo)致發(fā)熱、休克、多器官功能障礙綜合征等癥狀。此外，LPS還可以影響血管緊張素和一氧化氮的合成，從而導(dǎo)致血壓升高和血管擴(kuò)張。LPS的毒性與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。根據(jù)其O抗原的不同，LPS可分...
Sigmaaldrich二甲基亞砜(DMSO)是一種無(wú)色、透明的有機(jī)化合物，分子式為(CH3)2SO，具有極強(qiáng)的溶解性能和良好的可滲透性。它在醫(yī)藥、化工、生物學(xué)等領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用。首先，DMSO具有優(yōu)異的溶解性能，在醫(yī)藥領(lǐng)域中被廣泛用作溶劑和載體。由于其特殊的物理性質(zhì)和對(duì)生物膜的穿透能力，DMSO可以促進(jìn)藥物的滲透和吸收，提高藥效和降低毒性。因此，它常被用來(lái)促進(jìn)口服藥物的吸收，或作為外敷藥物的溶劑，用于局部治療皮膚感染和炎癥等。其次，DMSO在化工領(lǐng)域中也有重要的應(yīng)用。它可...
qPCR（Quantitativereal-timePCR）實(shí)驗(yàn)中，模板質(zhì)量、引物設(shè)計(jì)、qPCR反應(yīng)體系、程序設(shè)置，均是影響實(shí)驗(yàn)成功的重要因素。其中，qPCR的引物設(shè)計(jì)尤為重要，決定了qPCR擴(kuò)增效率和擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性，引物設(shè)計(jì)都有哪些原則和要點(diǎn)，一起來(lái)了解一下吧！qPCR引物設(shè)計(jì)原則1.引物長(zhǎng)度一般在18~30nt之間，擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度盡量控制在80~200bp之間。引物設(shè)計(jì)太短會(huì)導(dǎo)致非特異擴(kuò)增，太長(zhǎng)則容易形成二級(jí)結(jié)構(gòu)(如發(fā)夾結(jié)構(gòu))。擴(kuò)增產(chǎn)物太長(zhǎng)會(huì)影響到PCR擴(kuò)增效率。2.引物...
隨著疫情的逐步放開(kāi)和新冠感染人群的擴(kuò)大，越來(lái)越多的證據(jù)表明提升自身免疫力是對(duì)抗疫情、保障健康的必要和核心條件。而面對(duì)著新冠的持續(xù)變異和疫情在世界各地的發(fā)展，全國(guó)三甲醫(yī)院專家紛紛呼吁，積極開(kāi)展定量免疫力評(píng)估，將免疫力評(píng)估明確列入新冠感染診療方案之中，并根據(jù)實(shí)際評(píng)估結(jié)果進(jìn)行免疫力調(diào)節(jié)，以達(dá)到提升自身免疫力的目的。中華醫(yī)學(xué)會(huì)健康管理學(xué)分會(huì)前任主任委員、解fang軍總醫(yī)院第二醫(yī)學(xué)中心健康管理研究院主任曾強(qiáng)教授指出：「總體來(lái)說(shuō)，人們?cè)凇宏?yáng)康』之后，其免疫功能尚處于低下?tīng)顟B(tài)，這時(shí)可以通過(guò)...
胰酶使用注意：1、在使用胰酶細(xì)胞消化液的過(guò)程中要特別注意避免消化液被細(xì)菌污染。2、胰酶細(xì)胞消化液消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則細(xì)胞鋪板后生長(zhǎng)狀況會(huì)較差。貼壁細(xì)胞的消化：1、吸去培養(yǎng)液，用無(wú)菌的PBS、Hanks液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清2、加入少量胰酶細(xì)胞消化液，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，根據(jù)胰酶效率差異可以增加惑減少胰酶用量。室溫放置30秒至2分鐘（不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同）3、顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化呈白茫狀...
一、細(xì)胞培養(yǎng)基的概念和原理細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境，是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基的含義幾乎相同，英文都是medium。當(dāng)它是粉劑時(shí)，傾向性地稱為培養(yǎng)基，而將粉劑配成液體后，多稱為培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中常常補(bǔ)加血清、抗生素等成分。培養(yǎng)基主要包括天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基和無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基等。天然細(xì)胞培養(yǎng)基是人們?cè)缙诓捎玫募?xì)胞培養(yǎng)基，直接取自于動(dòng)物組織提取液或體液，如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，但成分復(fù)雜，差異...
隨著免疫熒光技術(shù)的不斷發(fā)展，熒光染料及其標(biāo)記的抗體偶聯(lián)物也被廣泛的應(yīng)用于生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中。目前，市場(chǎng)上抗體及蛋白標(biāo)記的熒光染料主要有CFTM系列(BIOTIUM,USA);AlexaFluor®系列(Lifetechnology,USA);DyLight系列;Cy系列;IRDye系列等等。使用最多的為AlexaFluor®系列和CFTM系列。一、CFTM系列染料的核心對(duì)比AlexaFluor®系列具有以下幾點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：1、新型羅丹明核心羅丹明染料以優(yōu)異的耐光性...
關(guān)于SCI拼圖的經(jīng)驗(yàn)介紹很多，但對(duì)于強(qiáng)迫癥的山姆大叔來(lái)說(shuō)，并沒(méi)能找到滿足自己要求的教程，面臨多個(gè)問(wèn)題：-原始圖片尺寸大小不一，拼圖時(shí)大大小小很鬧心-圖片不清晰，分辨率不夠，條帶看不清，色彩不好看-圖片對(duì)齊困難，每個(gè)分圖內(nèi)的圖片間距也不好統(tǒng)一-圖拼好了，但發(fā)現(xiàn)原圖要改，又得從頭來(lái)一遍一番摸索，發(fā)現(xiàn)還是PS和AI雙刀齊上來(lái)得快，而且這個(gè)操作不僅適用于Western拼圖，SCI文章內(nèi)的圖片均可以輕松解決。原則：PS修圖，AI拼圖（均為CS6版本）以Western的條帶為例：圖1這是...
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